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Hybridation in situ



L'hybridation in situ permet la détection et la localisation d'ARN messagers sur coupes histologiques de tissus inclus en paraffine, grâce à l'utilisation de sondes ARN complémentaires marquées.




Ces sondes s'hybrident avec les séquences d'intérêt et peuvent alors être visualisées après réaction enzymatique en microscopie optique. Cette technique est complémentaire de la technique d'immunohistochimie, qui met en évidence la localisation d'une protéine spécifique.

Afin de compléter ses compétences en caractérisation tissulaire, Novotec a entrepris, depuis 2010, de développer l'hybridation in situ. Du tissu à la cellule, de la protéine aux messagers, Novotec est capable d'appréhender l'ensemble des mécanismes cellulaires.

Peau - Hybridation in situ avec une sonde ARN col3a1Peau - Hybridation <em>in situ</em> avec une sonde ARN col1a1Substitut cutané - Hybridation <em>in situ</em> avec la sonde ARN vegf-A

Novotec vous propose un service à la carte :

  • Détermination des séquences : GenBank Accession Number, Gene ID...

  • Elaboration de la sonde, marquage et purification : Sondes ARN (sens et antisens), marquage à la digoxigénine. Possibilité d'utiliser des sondes mises au point et validées par Novotec (col1a1, col3a1, vegf-a...)

  • Hybridation in situ : Optimisation des différentes conditions d'hybridation en fonction du tissu et de la sonde.

chromatogramme (Dna baser v2)






References

  • «In situ Hybridization to evaluate the wound healing process of a bilayered living cell-based construct (Apligraf®) in a nude mice model - 2010 june, TERMIS-EU, Galway, Ireland.»
    Rousseau C. and Pagnon-Minot A., Guerret S., Hartmann D.J, Ronfard V.
  • «Short term integration on human bilayered living skin substitute (Apligraf®) grafted onto nude mice - 19th Annual Meeting of the Wound Healing Society with SAWC (Symposium on Advanced Wound Care) 2009 April 26-29, Gaylord Texan Resort and Convention Center, Dallas, Texas.»
    Rousseau C., Thillou F., Pagnon-Minot A., Guerret S., Hartmann D.J, Ronfard V.
  • «Characterization of spatial and temporal expression of pattern of Col15a1b during zebrafish development. Gene Expression Patterns 2011, 11, 129-134.»
    Bretaud S., Pagnon-Minot A.,Guillon E., Ruggiero F., Le Guellec D.
  • «Collagen XV, a novel factor in zebrafish notochord differentiation and muscle development. Dev Biol 2008, 316, 21-35.»
    Pagnon-Minot A., Malbouyres M., Haftek-Terreau Z., Kim H.R., Sasaki T., Thisse C., Thisse B., Ingham P.W., Ruggiero F., Le Guellec D.